Desarrollo de un método de micropropagación aplicable a genotipos selectos de Cedrela odorata L.

Abstract

La investigación se realizó en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos e invernadero de la Unidad de Biotecnología del CATIE, de enero a noviembre de 2001. El objetivo fue contribuir con el desarrollo de una metodología de micropropagación aplicable a genotipos selectos de C. odorata. Los explantes de nudo cotiledonar, obtenidos de semilla germinada in vitro, se establecieron en medio MON al 50 por ciento suplementado con 2,2 mM de 2-iP para iniciación de brotes axilares. Para evaluar el efecto de citocininas en la multiplicación, los brotes obtenidos se subcultivaron en el mismo medio, suplementado con 2,2, 6,5, 13,3 o 20 mM de BAP, kinetina o 2-iP. Con explantes epicotiledonares, se evaluaron los medios MON y WPM (100, 75, 50 y 25 por ciento) combinados con sacarosa (10, 20, 30, 40 gl-1), para obtener un medio de desarrollo que acondicionara los brotes antes del enraizamiento. Para el enraizamiento in vitro, se utilizaron brotes obtenidos de nudo cotiledonar establecidos en medio MON al 50 por ciento suplementado, en la fase de inducción con ANA (0,5 y 1,0 mgl-1) combinada con AIB (1,0 y 1,5 mgl-1), donde también se tuvo un testigo absoluto sin auxinas, mientras que para la fase de expresión se evaluó el efecto de carbón activado (0, 1,5, 2,0 y 3 gl-1) combinado con sacarosa (15, 30, 45 gl-1) y Agar o Phytagel como gelificante. Para el enraizamiento ex vitro se evaluaron altas concentraciones de ANA (11,5 y 23 mgl-1) y de AIB (43,0 y 86,0 mgl-1) más tiempos de oscuridad (8, 16 y 24 h) en arreglo factorial. Los explantes sobrevieron en todos los tratamientos de citocininas. El número máximo de brotes se obtuvo con BAP a 2,2 y 6,5 mM. Estos tratamientos también fueron estadísticamente superiores en cuanto a días a brotación, porcentaje de brotación y altura de brotes obtenidos. Las altas concentraciones de ésta y las demás citocininas produjeron callo en la base de los explantes. Hubo efecto del medio de cultivo, pero no de las concentraciones del medio ni de sacarosa para el desarrollo de los brotes. El mejor medio fue WPM al 50 por ciento suplementado con sacarosa a 30 gl-1, en base a la tendencia observada para altura de brote y porcentaje de sobrevivencia. Además, esta combinación favoreció más notoriamente el enraizamiento de los explantes. Hubo diferencia significativa (Duncan 0,05) entre el testigo absoluto y los tratamientos de auxina en cuanto al porcentaje de enraizamiento y número promedio de raíces por explante. Se observó efecto de ANA para la inducción de raíz. Sólo hubo diferencia estadística para número de raíces, y en general las bajas concentraciones de ANA o AIB favorecieron el enraizamiento. La mejor combinación fue ANA a 0,5 mgl-1 más AIB a 1,0 mgl-1. No hubo efecto de la interacción entre carbón activado, sacarosa y tipo de gelificante para la expresión de raíz. El carbón activado en general, y las altas concentraciones del mismo en particular, afectaron la sobrevivencia de los brotes y el porcentaje de enraizamiento y el número y la longitud de raíces. Por el contrario, y aunque no hubo diferencias estadísticas, las altas concentraciones de sacarosa favorecieron el enraizamiento en cuanto al porcentaje y número de raíces. No hubo diferencias estadísticas entre los dos gelificantes evaluados.