Caracterización de clones de cacao (Theobroma cacao L.) resistentes y susceptibles a la moniliasis (Moniliophthora roreri [Cif & Par] Evans et al.) mediante marcadores RFLP

Abstract

El polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restricción (RFLP) es una metodología que depende de la propiedad de las endonucleasas de restricción para catalizar el rompimiento de las cadenas de ADN en sitios de reconocimiento específicos. Este clivaje del ADN origina fragmentos de longitudes definidas. Posteriormente, se procede a la detección de fragmentos particulares de ADN mediante la hibridación de secuencias moleculares clonadas (sondas), que permiten detectar variaciones a nivel genético. Las diferencias en los patrones RFLP representan la heterogeneidad genética existente entre los individuos de una especie. El presente trabajo estudió los patrones RFLP de plantas de cacao (Theobroma cacao L.) resistentes y susceptibles a la Moniliasis (Moniliophthora roreri [Cif & Par] Evans et al.), enfermedad que causa grandes pérdidas en el área centroamericana. El objetivo principal fue determinar la utilidad de esta metodología en la caracterización de estos dos grupos y, en general, de la colección de cacao del CATIE. Los clones estudiados fueron: CC-137, EET-67, EET-75, EET-183 y UF-273, resistentes a la Moniliasis y los clones susceptibles: POUND-7, CC-132, UF-29, UF-221, CATONGO y UF-613. Se logró la detección de polimorfismo con una de las sondas empleadas que corresponde a un gen de una proteína de reserva de semilla de 21 kilodalton (kD). Todas las enzimas de restricción usadas con esta sonda (Eco RI, Hind III, Hae III) detectaron polimorfismo, lo que indica rearreglos en el genoma de cacao. La sola combinación de la sonda 21 kD/Hae III permitió, además, separar los clones en seis grupos diferentes. Estos resultados demuestran la utilidad que tiene el análisis RFLP para estudiar la organización genómica, la taxonomía y la caracterización del germoplasma de cacao.