Uso de marcadores moleculares RAPDs (Random amplified polimorphic DNA) en ganado bovino adaptado a condiciones de trópico húmedo

Abstract

Se estudió el polimorfismo genético existente en las razas Romosinuano y Criollo Lechero Centroamericano, de hates presente en Turrialba, Costa Rica, a través del uso de marcadores moleculares RAPDs. El trabajo consistió en el establecimiento de los protocolos necesarios para la extracción y la amplificación de ADN, así como en el revelado del polimorfismo, Para ello, se seleccionaron animales con relaciones mínimas de parentesco dentro de cada hato, Para la raza Romosinuano (R) se consideraron las más destetadas disponibles, partiendo del supuesto de la mayor fijación de los caracteres de la raza, al ser productos de cruzamiento absorbentes, contando con un total de 19 animales. Mientras que para la raza Criollo Lechero Centroamericano (C) se tomó la totalidad de los animales, dado que la población presente era reducida, contando con 12 animales de diferentes edades. Como raza de comparación se incluyeron 10 animales Jersey (J) no emparentados, de los que se hizo la extracción de ADN. pero solo en seis de ellos se aplicó la amplificación. La extracción se realizó en muestras de sangre recolectadas por venopunción de yugular adicionadas con anticoagulante y conservadas en refrigeración durante su procesamiento. Se sometieron al proceso de extracción establecido a partir de la modificación de protocolos conocidos, probando diferentes volúmenes. EI protocolo de extracción mostró su eficiencia al obtener un rendimiento promedio de ADN (72J.1g1ml sangre) superior que 10 reportado por las metodologías originales. La metodología empleada para la amplificación de ADN resultó ser eficiente, presentándose los mayores problemas en la determinación de las concentraciones de enzima taq polimerasa (0.85 u) y primera (0.4-0.45 µM en volumen final) utilizadas.