Selección in vitro e invernadero de clones de Musa sp. para la evaluación de su resistencia a la Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis, MORELET)

Abstract

Se planteó establecer una metodología para la obtención del extracto crudo de Mycosphaerella fijiensis y probar su efecto biológico sobre hojas de vitroplantas en invernadero así como sobre cultivos in vitro de Musa sp. con diferente grado de resistencia a la enfermedad. La investigación se llevó a cabo en los laboratorios de fitopatología, Ganadería y biotecnología del CATIE. Se utilizaron ocho cultivos monospóricos del hongo, los materiales vegetales evaluados fueron: "Gran Enano", "Calcuta 4", "Curraré", "Embrapa-403", "Saba", y "Yangambí". Los trabajos se iniciaron inoculando conidios sobre las hojas de "Gran Enano" y "Calcuta 4". Se comprobó el grado de resistencia diferencial entre los materiales y la virulencia de las cepas utilizadas. Mediante la inoculación del medio M-1-D, con colonias de M. fijiensis y la aplicación de la metodología descrita se obtuvo el extracto crudo. La aplicación de 20 ul de la dilución del extracto crudo en carbonato de sodio al 0.5 por ciento y fosfato monobásico 0.1M provocó el desarrollo de lesión sobre hojas en todos los cultivares. Sin embargo la evaluación a las 24, 48, 72 y 96 horas permitió observar diferencias entre los materiales de varios grados de resistencia. Al usar 60 ul del extracto crudo, diluido en carbonato de sodio al 0.5 por ciento y fosfato monobásico 0.1 M, se observó reacción de necrosis de las células más externas que conforman el callo de "Gran Enano" 72 horas después de la inoculación del medio, este daño fue en aumento al usar dosis más altas. A diferencia, el uso de concentraciones de extracto crudo igualmente altas no provocaron reacción en los callos de "Calcuta 4", el cual presenta resistencia a la enfermedad. El análisis histológico del tejido foliar inoculado con conidios mostró que la mayor acumulación de compuestos fenólicos se localizó a nivel de células oclusivas en el clon "Calcuta 4" y en células epidérmicas vecinas en el cultivar "Gran Enano". Esto podría explicar parcialmente el comportamiento de los materiales a M. fijiensis. En el análisis histológico de los tejidos foliares de los seis materiales inoculados con extracto crudo, los cultivares "Gran Enano" y "Curraré" presentaron los mayores niveles de fenoles a las 96 horas después de la inoculación, seguidos por los materiales "Yangambí" y "Calcuta 4", donde se observó un aumento en la acumulación de fenoles con el tiempo. Los materiales "Saba" y "Embrapa-403", mostraron bajo contenido de fenoles. El uso del extracto crudo de M. fijiensis permite de manera rápida y eficaz (48 horas en pruebas de invernadero y 72 horas en cultivos de callos) identificar el grado de resistencia a la enfermedad de los materiales de Musa así tratados lo que representa un significativo ahorro en tiempo y recursos si pensamos hacer estas pruebas en campo utilizando el patógeno.